论文良渚北城墙考古土遗址表面藻类的分析是大学硕士与本科藻类毕业论文开题报告范文和相关优秀学术职称论文参考文献资料下载，关于免费教你怎么写藻类方面论文范文。
内容摘 要：为了探明造成潮湿环境土遗址生物污损的主要藻类类群,给后期生物退化机理的研究和防治体系的构建提供可靠依据,本研究采用现代分子生物学技术,对杭州良渚北城墙考古土遗址表面的藻类进行了检测和分析.结果表明,引起土遗址生物污损的病害藻类共3门5属,主要为蓝藻门念珠藻属类群,硅藻门菱形藻属与褐指藻属类群次之,蓝藻门壳藻属与绿藻门的未鉴定属最少.另外,苔藓植物门藓纲与薄囊藓属相近的类群在部分样品中占绝对优势.光合藻类与苔藓类群组成的不同主要受各采样位点的空间位置和土体含水量的差异所影响.降低考古土遗址附存环境中的光照和渗水可以有效地控制有害光合生物体的滋生蔓延和侵蚀.
关键词：土遗址；藻类；苔藓；克隆文库；群落组成；潮湿环境
中图分类号：K854.39 文献标识码：A 文章编号：1000-4106（2014）04-0114-07
一、引 言
藻类是引起文物病害的常见生物类型,它们对文物的生物退化作用主要表现在美学价值的降低和材料性质的改变两个方面.研究发现,蓝藻和绿藻在石质文物的生物退化过程中扮演着先锋入侵者的角色[1].藻类细胞增殖及色素积累引起的覆盖通常称为生物污损,而因细胞生物活性作用导致材料分解的过程可称为生物风化[2].绿藻生物膜的形成促进了材料表面对空气中污染物的捕获能力,导致文物逐渐变黑[3,4].同时,藻类可分泌大量的胞外聚合物,这种生物质胶体在文化遗产材料孔隙内的收缩与膨胀循环产生的机械力会进一步造成材质结构的破坏[5].不仅如此,文物表面的沉积物和藻类固定的碳水化合物还可为其他异养微生物提供生长基质,加速材料的退化[6].石质文物表面深绿色和黑褐色的硬壳状沉积物主要由蓝藻、绿藻、其他微藻、真菌和地衣组成[7,8].藻类的生长和增殖在很大程度上受制于温度、湿度、光照等环境因子,潮湿环境下建筑材料的变绿程度与其表面温度的变化呈负相关,另外,湿度水平和营养供应对于藻类的生长和增殖也发挥着重要作用[9].
我国文物资源丰富,历史建筑与考古遗址在中原、南方等地区的潮湿环境中分布广泛.受土体的物质组成、结构构造及其他物理化学性质的影响,土遗址本身就比较脆弱,在潮湿环境下更难以保存.近年来,我国文物保护工作者在潮湿环境土遗址原位加固材料的筛选[10]、“潮湿环境”范围的界定[11,12]、保护理念的探索与技术的研发方面开展了大量卓有成效的工作[13],为南方地区大型土遗址的保护提供了重要的理论依据和技术支持.
潮湿环境下土遗址病害生物的检测和鉴定至关重要,直接影响到对后期腐蚀退化过程的研究和防治措施的建立.然而,我国在遗产地生物病害的研究领域开展的工作还较少,对于文物病害霉菌、藻类与苔藓的鉴定主要依赖于传统形态学等手段[14],现代分子生物学检测技术仍未能在病害生物类型的检测中得到广泛应用[15].本研究以良渚古城北城墙考古土遗址表面的病害藻类为研究对象,旨在建立一种基于分子生物学技术的病害藻类快速检测方法,为准确判定文化遗产地的病害藻类的群落组成提供技术支撑.
二、材料与方法
2.1 取样地简介
良渚遗址位于浙江省杭州市余杭区,年降水量在1150—1550mm之间.根据潮湿状态下的土遗址分类及定量化的参数指标,该遗址地属于典型的湿润区潮湿环境与潮湿状态下的土遗址[11].
本文中的研究样点为良渚古城遗址北墙TG2,即北墙中段保存较好的地段,有4m×30m的南北向考古发掘探沟1条,发掘面积120m2（图1-a）.探沟东壁的地层堆积可分为耕土层、近代层、灰褐色斑块土和黄褐色粉沙土等12层[16].现场调查发现,遗址主要存在着水的侵蚀、裂隙、根部掏蚀、生物污损等病害,保存难度很大,目前已经采用搭建防雨棚等措施对土遗址进行了初步的保护.
2.2 样品采集
在“文物出土现场保护移动实验室”基础平台的支持下,项目组于2012年7月首先开展了研究样点的生物病害的现状调查,发现藻类、苔藓等光合生物已造成土遗址的大面积污染,考古文化层难以分辨.根据病害生物对考古土遗址造成污损颜色的差异选择3个采样位点（图1-b）,其中L1位点大致位于探沟底部深褐色土层,病害生物呈深铜绿色的不规则圆形或斑块状分布；L2位点污染面积最大,呈浅黄绿色粉末状,覆盖了多个考古文化层；L3位点大致位于黄褐色土层,主要表现为绿色污染.在各位点随机选择了3个取样点,采用无菌解剖刀收集病害生物体,分别置于无菌Eppendorf管中,带回实验室后用于样品基因组总DNA的提取.
2.3 实验方法
2.3.1 基因组总DNA提取
使用PowerSoilTM（MOBIO Laboratories,Solanabeach,CA,USA）DNA提取试剂盒提取样品总DNA,分装后置于-70℃保存备用.
2.3.2 目标片段扩增
分别以样品总DNA为扩增模板,选择CYA106F和CYA781R引物,扩增蓝藻16SrDNA基因[17]；选择p23SrV_f1和p23SnewR引物,扩增藻类23SrDNA 质体序列[18].反应体系（25μl）包括1U的Taq聚合酶,终浓度为0.2mM的dNTP,2.5μl10×反应缓冲液,单条引物浓度0.2mM,2.0μl模板（约含10ng DNA）.CYA106F和CYA781R引物对的扩增程序为：预变性94℃5min,然后在94℃变性45s,60℃退火45s,72℃延伸2min,完成35个扩增循环,终延伸72℃10min.p23SrV_f1和p23SnewR引物对的扩增程序为：预变性94℃2min,然后在94℃变性20s,55℃退火30s,72℃延伸30s,完成35个扩增循环,终延伸72℃10min.所有扩增产物用1.2%的琼脂糖凝胶电泳检测扩增片段的大小与扩增特异性.
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参考文献：
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