论文试述食品中大肠菌群检测和技巧是关于大肠菌群方面的论文题目、论文提纲、大肠菌群论文开题报告、文献综述、参考文献的相关大学硕士和本科毕业论文。
摘 要：大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一.检测结果其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏染色阴性无芽孢杆菌.本文阐述了两个标准版本的大肠菌群检测中的检测步骤、方法对比及染色镜检技巧.
关键词：大肠菌群 检测 技巧
大肠菌群的测定,在实际工作中存在不同检测方法.GB/T4289.3-2003、GB4789.3-
2016版都是现行有效的两个版本的检验标准.尽管方法各异,但乳糖发酵却是这些不同方法中的共同点.
一、大肠菌群检测
1、培养基准备：培养基 GB/T4789.03—2003：乳糖胆盐发酵培养基,伊红美兰琼脂,乳糖复发酵培养基.GB 4789.03—2016：月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）,煌绿胆盐肉汤（BGLB）.仪器超净工作台、生化培养箱、显微镜.
2.实验原理和方法
2.1检验步骤
依据GB/T4789.3—2003（食品卫生微生物学检验大肠菌群测定,检验主要有以下步骤：
（1）接种：以无菌操作取均匀后检样25 mL（g）放于含有 225 mL灭菌生理盐水的灭菌三角烧瓶中,经充分振摇做成1：l0的均匀稀释样液.根据食品卫生标准要求和对样品污染情况的判断,选择3个稀释度,每个稀释度接种3管,放置36℃±l℃的生化培养箱内培养24±2h.
（2）平板分离：将产气的发酵管分别划线在伊红美蓝琼脂平板上,置36℃±l℃的生化培养箱内培养24±2h.
（3）染色和证实：观察菌落形态,并做革兰氏染色镜检.革兰氏染色阴性的无芽胞杆菌的试管接种乳糖发酵管,置于36℃±1℃的生化培养箱内培养24±2h.
（4）结果报告：凡是乳糖管产气、革兰氏染色阴性的无芽胞杆菌,判定该管为大肠菌群阳性.根据大肠菌群阳性的管数,查 MPN检索表,乘以稀释倍数,报告每100 mL（g）样品中大肠菌群的MPN值.
2.2测试步骤
依据GB 4789.3—2016 （食品安全国家标准微生物学检验大肠菌群测定》,测试主要有以下步骤：（1）接种：以无菌操作取均匀后检样25 mL（g）放入盛有225mL灭菌磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯中,经充分振摇做成1：10的均匀稀释样液.根据食品卫生标准要求和对样品污染情况的判断,根据污染情况判断,依次制成十倍递增系列稀释样品匀液,选择3个稀释度,每个稀释度接种3管LST,放置 36±1℃的生化培养箱内培养24±2h.（2）证实：将产气的发酵管挑取一环菌液接种BGLB管,放置36±l℃的生化培养箱内培养48±2h.（3）结果报告：根据大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,乘以稀释倍数,报告每l mL（g）样品中大肠菌群的MPN值.在MPN检索表第一栏阳性管数下面列出的mL（g）,系指原样品（包括液体和固体）的mL（g）数,并非样品稀释后的mL（g）数,对固体样品理应注意固体样品的接种量.
样品1 g经10倍稀释后,虽加入1 mL 量,但其实际其中只含有0.1 g样品,故应按0.1 g记,不应按 1 mL记.接种第一梯度1g×3的样量是10倍稀释液的10mL.
二、2003版与2016版的大肠菌群检测新方法对比
2003版大肠菌群检验步骤检验采用三步（即乳糖发酵试验、分离培养和证实试验）.在食品检验上,除个别情况外,一般来说,如果平板上有较多典型大肠菌群菌落,革兰氏染色为阴性杆菌,即可做出判定.如平板上典型菌落甚少或均不够典型,则应多挑菌落做证实试验,以免出现假阴性.只作一步初发酵,对某些食品来说,误差是比较大的.这样做,会有相当部分的合格样品被作为不合格样品处理,应予注意.
2016版大肠菌群检测新方法与国际接轨,检验新技术进入国标行列,它釆用了LST一BGLB进行发酵培养.接种LST肉汤初发酵培养,如产酸、产气将培养物转种于BGLB肉汤培养,根据其阳性管数查阅MPN检索表即可做到到检测结果.2003版大肠菌群检测方法为经典方法,类似实验中仲裁法；2016版方法简便易行便于初学者（企业出厂检验人员）操作.类似实验中的快速测定,省时省力可提高速度与效率.在实际工作的检测中比对,两种方法并存结果不存在明显差异.
三、大肠菌群实验技巧
革兰氏染色镜检依据GB/T4789.3—2003标准.
典型菌落挑选→革兰氏染色镜检
3.1菌落挑选：在EMB平板上挑选典型菌落进行镜检
大肠杆菌菌落呈黑紫色有光泽或无光泽时,检出率最高；红色、粉红色菌落检出率较低.
挑取菌落数与大肠杆菌的检出率密切相关.
3.2革兰氏染色镜检
实际操作步骤技巧关键点在脱色.
（1）涂片：均匀而薄.
（2）固定：火焰固定时温度适宜,把涂片在酒精灯火焰上方、左右或以旋转方式快速通过,将涂片触碰手握拳头时虎口处,以不炽热为度,过热则镜检时菌体变形,不利于观察及判定.
（3）初染：滴加结晶染液1分钟完成,倾斜用细水流冲洗待干.
（4）媒染：滴加碘液媒染,水洗.
（5）脱色：掌握脱色度是染色成败的关键,G-菌细胞壁含有较多被乙醇溶解的类脂质,而且肽聚糖质较薄,交联度低,用95%的乙醇脱色溶解了类脂质增加细胞通透性,使被染的结晶紫和碘复合物易于渗出,结果G-菌脱去初染的紫色,复染上蕃花花红的颜色,所以菌体呈红色.在实际操作中薄而均匀的涂片上滴加95%的乙醇约20至30秒,流出液体无色时终止脱色,否则脱色过度会造成G+误判为G-菌.
（6）沙黄复染液（番红花红）复染.
（7）冲洗：玻片倾斜,用稳定的细流冲洗.
（8）涂片宜挑取培养18～24h菌落,老龄化的G-菌呈G+菌,工作中注意避免出现假阳性和假阴性.
（9）镜检用10 ×100 油镜进行镜检,香柏油与载玻片的折射率相近,滴加香柏油会使通透性增加,在镜检中可观察到清晰的物象.在载玻片所要观察部位滴上一滴香柏油,换上油镜,小心调节粗准焦螺旋,使油镜慢慢下降或慢慢上升载合物台,从侧面观察油镜下端与标本之间的距离,当油镜下端开始触及油滴时即可停止.从目镜观察,用手调节粗准焦螺旋,即可观察到清晰的标本物像.
参考文献
[1]中华人民共和国国家标准GB 4789.3-2016《食品安全國家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》.
[2]《食品微生物检测工作指南》中国标准出版社 2012年.
总结:本文关于大肠菌群论文范文,可以做为相关论文参考文献,与写作提纲思路参考。
参考文献：
1、 试述市政工程质量实验检测 摘 要：对控制工程质量来说，对施工中质量实验检测工作严格控制有着重要的作用，因此，对相应措施采取，并且对质量实验检测工作加强，从而使质检机构和工。
2、 计算机信息技术在食品质量安全和检测中应用 在当今时代，食品安全问题已经成为人们的热门话题，在食品安全问题的监管上，计算机信息技术的作用是不可小觑的，它在食品安全监管上所做出的安全保障最大。
3、 试述高速公路路基路面无损检测技术的探究 摘 要：高速公路在建成运营后将面临承受长时间的荷载压力，一旦高速公路的建设质量不佳就会对公路的使用寿命和使用性能造成影响，严重的还会造成较大的交。
4、 食品中重金属元素检测方法进展 摘要 食品中重金属污染日益严重，已影响人类健康、经济和生态的可持续发展。目前用于检测重金属的方法很多，包括光谱法、电化学法、色谱法、比色法、免疫。
5、 百项标准集群支撑机动车检测体系 朝阳县鸿运机动车安全检测有限公司位于朝阳县柳城镇郭家村，始建于2008年，占地总面积18200平方米，总投资3000万元，是一家以机动车检测为主。
6、 食品检验检测的质量控制探究 【摘 要】食品安全问题与国民健康息息相关，而食品安全问题与食品检测质量具有紧密的联系，所以各地政府都在加强食品安全的控制。论文从食品检测样品的抽。