论文我国甘蔗锈病病原菌甘蔗品系抗褐锈病基因Bru1分子检测是关于本文可作为锈病方面的大学硕士与本科毕业论文叶锈病怎么治论文开题报告范文和职称论文论文写作参考文献下载。
摘 要 为了解我国甘蔗锈病病原菌发生以及优良甘蔗新品种（系）抗褐锈病基因Bru1的分布频率情况,以来自我国5省（区）81份疑似甘蔗锈病叶片样品为材料,分别用Pm1-F/Pm1-R和Pk1-F/Pk1-R引物对进行褐锈病菌（Puccinia melanocephala）和黄锈病菌（Puccinia kuehnii）分子鉴定.结果表明,锈病病原菌检出率为40.7%,除了福建省福州市叶片样品仅检测到P. melanocephala外,其他省（区）的叶片样品均检测到2种锈病病原菌,且存在混合侵染现象.对24份黄锈病菌阳性PCR产物（527 bp）克隆并测序,结果发现P. kuehnii间隔区1（ITS1）第183个核苷酸存在单核苷酸多态性（SNP）,其中,A碱基（183A）、G碱基（183G）位点的病菌分离物分别占29.2%和25.0%,2种碱基（183A/G）位点的混合病菌分离物有45.8%.通过R12H16和9020-F4/RsaI两种分子标记对40份甘蔗新品种（系）抗褐锈病基因Bru1进行分子检测,结果表明,42.5%参试新品种（系）含抗褐锈病基因Bru1,这些材料可作为甘蔗抗褐锈病新品种加以推广应用.
关键词 甘蔗锈病；病原菌；新品种（系）；抗褐锈病基因Bru1；分子检测
中图分类号 S435.661 文献标识码 A
Abstract The aim of this study was to investigate the incidence of causal pathogens causing sugarcane rust and frequency of Bru1 gene in new elite sugarcane clones. Two sets of primers of Pm1-F/Pm1-R and Pk1-F/Pk1-R were used for the identification of Puccinia melanocephala and Puccinia kuehnii respectively, causing the sugarcane rust in 81 leaf samples collected from five provinces in China. PCR assay revealed 40.7% of samples were verified to infect with P. melanocephala or/and P. kuehnii. Co-infection with two causal fungi was observed in leaf samples from most of provinces except for Fuzhou, Fujian. Subsequently, PCR products from 24 leaf samples infected with P. kuehnii were cloned and then sequenced to analyze the SNP（Single Nucleotide Polymorphism）in P. kuehnii ITS1 183A/G locus. Results showed that allele 183A and 183G were observed in 29.2% and 25.0% causal isolates, respectively, whereas 183A/G was detected in 45.8% causal isolates. Two marker-assisted R12H16 and 9020-F4/RsaI were used for screening of Bru1 resistance gene for brown rust in 40 new elite sugarcane clones. Bru1 frequency was 42.5% in the tested clones, of which would be applied in the effective and durable resistance in sugarcane against the P. kuehnii.
Key words Sugarcane rust； Pathogenic bacteria； New varieties（or lines）； Bru1（brown rust resistance genes）； Molecular detection
doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2016.05.017
甘蔗锈病是一种重要的世界流行的甘蔗真菌性病害,分为褐锈病（Brown rust）和黄锈病（Orange rust）2种类型,其病原菌分别为担子菌纲柄锈科（Pucciniaceae）柄锈菌属（Puccinia）的黑顶柄锈菌Puccinia melanocephala H. & P. Syd. 和屈恩柄锈菌Puccinia kuehnii Butler[1].甘蔗褐锈病分布广泛、为害较大,在多数种植甘蔗的国家或地区均有发生,可以引起感病品种产量损失10%～40%；甘蔗黄锈病主要分布于亚洲和澳大利亚,近年来已扩散到美国的弗罗里达州以及墨西哥、巴西等西半球国家或地区,在非洲国家目前还未有黄锈病发生的报道[1-2].
甘蔗褐锈病和黄锈病可以通过田间甘蔗感病症状及夏孢子的颜色和形态加以区别.然而,夏孢子形态特征上的差异细微,且仅当孢子堆完全成熟时才可通过高倍显微镜鉴别,受到繁殖季节、病原保存、仪器设备等诸多因素的限制.利用分子生物检测手段来区别这2种病原菌已有报道.Glynn等[2]针对P. melanocephala和P. kuehnii这2种病原菌分别设计了特异性常规PCR和实时荧光PCR引物及探针；此外,利用PIRA-PCR（Primer-introduced restriction analysis PCR）技术检测分析P. kuehnii病菌,发现PkPmF/PkPmR引物扩增的PCR产物（606 bp）第183个核苷酸存在SNP（Single Nucleotide Polymorphism）位点,为A或G碱基[2].
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参考文献：
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